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FlowJo是美國斯坦福大學(xué)Leonard Herzenberg(FACS機(jī)器的發(fā)明者)實(shí)驗(yàn)室在90年代研發(fā)的一款流式數(shù)據(jù)分析軟件。FlowJo由于功能強(qiáng)大,簡(jiǎn)單易用,已經(jīng)被領(lǐng)域內(nèi)的科學(xué)家、實(shí)驗(yàn)室廣泛引用;同時(shí)FlowJo也是各高影響力核心期刊引用最多的流式數(shù)據(jù)分析軟件。但是在使用FlowJo進(jìn)行流式數(shù)據(jù)分析的時(shí)候,有些術(shù)語的含義非常常見,但是其具體含義又是什么呢?在這里簡(jiǎn)單做一些總結(jié),總結(jié)一些常見術(shù)語,供大家參考。 參數(shù)圖 1-1 一維直方圖Histogram 每一個(gè)細(xì)胞單參數(shù)的測(cè)量數(shù)據(jù)可以整理成統(tǒng)計(jì)分布,以直方圖的方式來顯示。在圖中,橫坐標(biāo)表示熒光信號(hào)或散射光信號(hào)相對(duì)強(qiáng)度的值,其單位是道數(shù),可以是線形(line)或者對(duì)數(shù)(log)。縱坐標(biāo)一般是細(xì)胞數(shù)(count)。?? ![]() ![]() 1-2 二維散點(diǎn)圖Dot Plot 在二維圖的中,橫坐標(biāo)/縱坐標(biāo)都表示熒光信號(hào)或散射光信號(hào)相對(duì)強(qiáng)度的值,可以是線形(line)或者對(duì)數(shù)(log)。雙參數(shù)圖可以將樣品細(xì)胞群分開,常用來分析多參數(shù)數(shù)據(jù)。? ![]() ![]() 1-3 其它參數(shù)圖 ? ![]() Density(密度圖) ![]() ?Contour(等高線圖) ?門“Gate” 2-1 門的形式 ![]() 區(qū)域(region,R) ![]() 標(biāo)記(Marker) ![]() “十”字形(Quant) 2-2 定義“門”的方法(Gates) (1)門的3種組合:and; or; not(eg.Gate4=Gate1 or Gate2 or Gate3)? ![]() (2)Convert Marker To Gate(eg.M1=Gate 5)? ![]() (3)Convert Quads To Gates? ![]() 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 統(tǒng)計(jì)方式:百分比(%)&熒光強(qiáng)度(MFI) (1)百分比(%):一種細(xì)胞占樣本中所有細(xì)胞的比例? ![]() (2)熒光強(qiáng)度(MFI):Median=164.74所對(duì)應(yīng)的值跟細(xì)胞表面受體個(gè)數(shù)正相關(guān)。 Mean:平均熒光強(qiáng)度;Median:熒光強(qiáng)度的中位數(shù);Mode:眾數(shù),是一組數(shù)據(jù)中出現(xiàn)次數(shù)最多的數(shù)值;Geometric mean:幾何平均數(shù),是指n個(gè)觀察值連乘積的n次方根,計(jì)算公式為:? ![]() ![]() 4-1 ?峰圖疊加(Overlay) ![]() 方式一?? ![]() ???????????????方式二 4-2 點(diǎn)圖疊加(Overlay) ![]() ![]() 05 擬合 5-1 模擬分析——細(xì)胞增殖 ![]() 5-2 模擬分析——細(xì)胞周期 ![]() 5-3 劑量效應(yīng) ![]() |
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