核酸分子量、拷貝數(shù)計算方法

1A260 吸光度值=ds DNA50mg/ml

=ss DNA33mg/ml

=ss RNA40mg/ml

(OD260) x (dilution factor) x [33 或40或50]/ (1000) = mg/ml

MW = 克/摩爾

1 摩爾= 6.02 x 1023 摩爾分子(拷貝數(shù))

平均分子量:

dsDNA=(堿基數(shù)) x (660 道爾頓/堿基)

ssDNA=(堿基數(shù)) x (330 道爾頓/堿基)

ssRNA=(堿基數(shù)) x (340 道爾頓/堿基)

拷貝數(shù)計算公式:

(6.02 x 10的23次拷貝數(shù)/摩爾) x (濃度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml.

例：3000 堿基質粒， 濃度100 ng/ml ， MW = 3000 bp x 660 dalton/bp = 1.98 x 10的6次 daltons，1 mol = 1.98 x 10的6次 g.

(6.02 x 10的23次拷貝數(shù)/摩爾) x (1x 10的-7次克/微升) / (1.98 x 10的6次 克/摩爾) = 3 x 10的10次 copies/ml.

oligo’s:(mg/ml) / MW x 10的6次 = mM